Kit Pengekstrakan DNA/RNA Virus

 

Nama Produk	Kucing.No.	Spesifikasi
Kit Pengekstrakan DNA/RNA Virus	G3647-50T	50T

 

 

Kit ini direka untuk pengasingan pantas pelbagai DNA/RNA virus daripada serum, plasma, air kencing, supernatan medium kultur sel, stok virus dan tisu yang dijangkiti. Dengan menggunakan ciri-ciri lajur penjerapan asid nukleik yang mengikat secara balik kepada asid nukleik, ditambah dengan sistem penimbal khas, asid nukleik dibenarkan untuk mengikat secara khusus pada matriks membran, dan protein, serpihan sel dan bahan pencemar lain dibilas dengan berkesan, dan akhirnya asid nukleik dicairkan daripada lajur penjerapan dengan Air Tanpa Nuklease. DNA/RNA berkualiti tinggi yang diperolehi boleh digunakan terus dalam PCR hiliran, sintesis cDNA, RT-qPCR dan eksperimen biologi molekul lain.

 

 

Proteinase K dan RNA Pembawa dihantar dengan ais basah dan disimpan pada -20 darjah . Reagen lain dihantar dan disimpan pada suhu bilik; sah sehingga 1 tahun.

 

 

Nombor Komponen	Komponen	G3647-50T
G3647-1	PenampanVLB	10 mL
G3647-2	Proteinase K	1 mL
G3647-3	RNA pembawa	150 μL
G3647-4	PenampanVWA	12 mL
G3647-5	Penampan VWB	15 mL
G3647-6	Air Tanpa Nukleus	12 mL
G3647-7	Lajur Putar dengan tiub Koleksi	50
Manual		Satu salinan

 

 

1. Jika BufferVLB dan BufferVWA mendakan, sila panaskan pada 37 darjah dan gunakannya apabila ia dipulihkan kepada suhu bilik.

2. Sila tambahkan 18 mL etanol anhydrous kepada BufferVWA dan 60 mL etanol anhydrous kepada BufferVWB sebelum penggunaan pertama.

3. RNA pembawa boleh dibungkus dan disimpan pada darjah -20 sebelum penggunaan pertama, dan pembekuan dan pencairan berulang harus dielakkan.

4. Sila pra-sejukkan pengisar jika mengisar tisu dengan pengisar.

 

 

1. Penyediaan sampel:

a. Lisis serum, plasma, air kencing, supernatan medium kultur sel dan stok virus: Persampelan 10-200 μL serum, plasma, air kencing, supernatan kultur sel atau stok virus. Jumlah awal kurang daripada 200 μL boleh diisi semula kepada 200 μL dengan PBS atau Air Tanpa Nuklease.

b. Lisis tisu yang dijangkiti: Letakkan 10~20 mg tisu yang dijangkiti segar atau terpelihara dalam 1.5 mL tiub empar bebas nuklease yang mengandungi 2~3 pcs manik pengisar 3 mm (disyorkan G0203) atau gunakan tiub pengisar khas (HT yang disyorkan-200- M). Letakkan segera tiub emparan atau tiub pengisar yang mengandungi tisu dalam nitrogen cecair, dan kemudian kisar tisu dengan teliti untuk homogen pada suhu rendah menggunakan pengisar tisu (disyorkan KZ-5F-3D, jika tisu itu tidak diseragamkan secara menyeluruh, hasil dan kualiti DNA/RNA akan terjejas). Tambah 200 μL PBS atau Air Tanpa Nuklease selepas dikisar.

2. Tambah 200 μL BufferVLB, 20 μL Proteinase K dan 3 μL RNA Pembawa. Selepas kacau sebati, eramkan pada suhu 56 darjah selama 10 minit.

3. Tambah 200 μL etanol kontang, gaul terbalik.

4. Pindahkan larutan daripada langkah sebelumnya ke Lajur Putaran, empar pada 12,000 rpm selama 1 minit dan buang turasan daripada tiub Pengumpulan.

5. Tambahkan 500 μL Penampan VWA ke Lajur Putaran, sentrifuge pada 12,000 rpm selama 1 minit dan buang turasan daripada tiub Pengumpulan.

6. Tambahkan 700 μL Penampan VWB pada Lajur Putaran (sila tambah Penampan VWB di sepanjang dinding paip Lajur Putaran untuk membantu menyiram sisa garam pada dinding paip). sentrifuge pada 12,000 rpm selama 30 saat, dan buang turasan.

7. Ulang langkah6.

8. Letakkan Lajur Putaran pada tiub Koleksi, empar pada 12,000 rpm selama 2 min.

9. Pindahkan Lajur Putaran ke tiub emparan 1.5 mL bebas Nuklease baharu, buka penutup selama 3~5 minit pada suhu bilik, supaya sisa etanol Lajur Putaran boleh tersejat sepenuhnya.

10. Tambah 30~50 μL Air Tanpa Nuklease ke dalam tiub emparan, berdiri pada suhu bilik selama 5 minit, emparan pada 12,000 rpm selama 2 minit pada suhu bilik untuk mengumpul larutan RNA. Untuk mendapatkan kepekatan RNA yang lebih tinggi, anda juga boleh menambah eluen pertama kembali ke Lajur Putaran RNA, kemudian berdiri pada suhu bilik selama 5 minit dan sentrifuge selama 2 minit untuk mengumpul RNA semula.

 

 

1. Sila baca Manual Produk dengan teliti sebelum digunakan.

2. Oleh kerana penambahan RNA Pembawa dalam proses pengekstrakan, kuantiti tidak dapat ditentukan oleh elektroforesis atau absorptometer.

3. RNA Pembawa yang disediakan oleh kit ini ialah RNA daripada E. coli, yang terutamanya untuk meningkatkan kecekapan pemulihan asid nukleik surih dan mencegah degradasi RNA surih. Jika primer PCR mempunyai homologi tinggi dengan RNA Pembawa, primer boleh direka bentuk semula.

4. Sebelum elusi, etanol hendaklah dicairkan sepenuhnya untuk mengelakkan pengaruh baki etanol pada eksperimen hiliran.

5. Jangan keringkan untuk masa yang lama, supaya tidak menjejaskan kecekapan elusi asid nukleik.

6. Untuk keselamatan dan kesihatan anda, sila pakai kot makmal dan sarung tangan pakai buang.

 

Untuk Kegunaan Kajian Sahaja!

 

 

Cool tags: kit pengekstrakan virus dna/rna, kit pengekstrakan DNA/rna virus China pengeluar, pembekal, kilang