Pengenalan Produk

Nama Produk	Kucing. Tidak.	Spesifikasi
Coomassie Cemerlang Biru G250	G2039-250ML	250 mL

Penerangan/Pengenalan Produk

Coomassie Brilliant Blue G250 boleh mengikat protein dengan cepat. Penyerapan maksimum Coomassie Brilliant Blue G250 ialah 488 nm dalam keadaan bebas. Selepas mengikat protein, penyerapan maksimum berubah kepada 595 nm. Nilai penyerapan optik adalah berkadar dengan kandungan protein, jadi ia boleh digunakan untuk pengesanan kuantitatif protein. Produk ini juga boleh digunakan sebagai tambahan kepada kit pengesanan kuantitatif protein G2001 Bradford Assay.

Keadaan Penyimpanan dan Penghantaran

Hantar dan simpan pada suhu bilik, sah selama 12 bulan.

Protokol/Prosedur Ujian

1. (Pilihan) Melukis lengkung piawai (kaedah pembaca plat mikro): Larutkan BSA dalam air untuk menyediakan 0.5 mg/mL larutan kerja standard protein. Penyelesaian kerja standard protein ditambah pada 96-plat perigi pada tahap 0, 1, 2, 4, 8, 12, 16, 20 μL, dan kemudian kecerunan berfungsi larutan ditambah kepada 20 μL dengan PBS atau garam. Lengkung kecerunan kepekatan protein ialah 0, 25, 50, 100, 200, 300, 400 dan 500 ug/mL. Jika hanya perbandingan kuantitatif relatif dibuat, tiada lengkung standard diperlukan.

2. Sediakan sampel untuk diuji: Sampel protein yang akan diuji dicairkan dengan sewajarnya (kepekatan protein sampel boleh dikesan melalui pra-eksperimen untuk berada dalam julat lengkung piawai, untuk memastikan kebolehpercayaan keputusan ujian ), dan 20 μL setiap sampel ditambah pada 96-plat perigi. Sampel yang akan diuji hendaklah dicairkan dalam larutan yang sama seperti standard protein.

3. Pengesanan: 200 μL larutan G250 biru cemerlang Coomassie ditambah pada setiap perigi dan dicampur dengan teliti (96-plat perigi boleh diletakkan pada pengayun selama 30 saat). Selepas 3-5 min pada suhu bilik, lengkung piawai No. 0 digunakan sebagai rujukan, dan pengukuran kolorimetrik dilakukan pada panjang gelombang 595 nm, dan nilai penyerapan setiap telaga direkodkan.

4. Pengiraan: Kandungan protein kecerunan (ug/mL) dalam lengkung piawai diambil sebagai absis, dan nilai penyerapan cahaya diambil sebagai ordinat untuk melukis lengkung piawai. Mengikut nilai penyerapan sampel, kepekatan protein sampel yang akan diukur dalam telaga yang sepadan boleh didapati pada lengkung piawai (ug/mL), dan kemudian didarabkan dengan pencairan sampel, kepekatan protein sebenar sampel yang hendak diukur.

5. Di samping itu: jika spektrofotometer digunakan untuk menentukan, tabung uji kaca atau tiub kolorimetrik kaca digunakan sebagai saluran tindak balas untuk membuat lengkung standard. Selepas mencairkan sampel protein yang akan diuji dengan betul, tambahkannya ke dalam tabung uji kaca atau tiub kolorimetrik baru dengan saiz sampel 1 mL. Tambah 3 mL larutan Coomassie biru cemerlang G250 ke dalam tiub kecerunan lengkung standard dan tiub sampel, gaul sebati, berdiri pada suhu bilik selama 3-5 min, kemudian gunakan spektrofotometer untuk pengesanan kolorimetrik.

6. Pengesanan: Panjang gelombang spektrofotometer ditetapkan kepada 595 nm, dan lengkung piawai dan sampel yang akan diuji disifarkan dengan tiub No. lengkung piawai 0 sebagai rujukan. Lengkung piawai dilukis seperti yang diterangkan dalam Langkah 4 dan kepekatan protein dalam sampel yang akan diuji dikira.